Набор для аминокислотного метода Уэлча, используемый в исследовании семаглутида

Компания Welch Materials гордится тем, что предлагает хроматографические решения, способствующие инновациям в области наук о жизни. Мы рады сообщить, что наш набор для аминокислотного метода был успешно использован в недавнем рецензируемом исследовании, опубликованном компанией Precise Biopharma Private Limited в журнале World Journal of Biology Pharmacy and Health Sciences .

В статье под названием «Разработка и валидация метода ВЭЖХ для определения молярного соотношения аминокислот в семаглутиде» подчеркиваются надежные аналитические возможности решения Уэлча для аминокислотного анализа в сложных рабочих процессах характеристики пептидов.

Это сотрудничество знаменует собой важную веху не только для Уэлча, но и для более широкой области пептидной терапии, где точное профилирование аминокислот остается критически важным для разработки лекарственных препаратов, контроля качества и соблюдения нормативных требований.

Исследование, проведённое компанией Precise Biopharma, было сосредоточено на разработке точного, достоверного и надёжного метода ВЭЖХ для количественного определения молярного соотношения аминокислот в семаглутиде , агонисте рецептора GLP-1, используемом для лечения диабета 2 типа и ожирения. Будучи пептидом длительного действия, содержащим 34 аминокислотных остатка, семаглутид представляет собой сложную аналитическую задачу из-за своей структурной сложности, химических модификаций и высокой молекулярной массы.

Целью исследования было разработать и валидировать аналитический метод определения содержания аминокислот в семаглутиде. Целью было убедиться, что молярные соотношения аминокислот соответствуют требованиям аналитического применения препарата.

Чтобы добиться этого, исследователи выбрали набор для аминокислотного метода Уэлча , который объединяет высокопроизводительную колоночную технологию с оптимизированными протоколами предколоночной дериватизации и системами подвижной фазы, что позволяет проводить разделение и количественную оценку аминокислот с высоким разрешением.

Набор для аминокислотного метода Уэлча разработан для упрощения и стандартизации анализа аминокислот с использованием предколоночной дериватизации с использованием реагентов PITC. В набор входят:

• Высокоэффективная колонка для аминокислотного анализа .
• Набор реагентов для дериватизации (A и B, по 10 мл/флакон каждого), а также разбавитель (20 мл/флакон).
• Стандарт аминокислот (1 мл).

Основные преимущества:

• Быстрая реакция дериватизации — завершается всего за 30 минут при комнатной температуре.
• Высокая стабильность производных , обеспечивающая последовательное и надежное обнаружение.
• Один, четко определенный продукт реакции для каждой аминокислоты.
• Сокращение общего времени анализа , повышение эффективности и производительности лаборатории.

В опубликованной статье семаглутид подвергали гидролизу HCl при 110 °C в течение 16 часов, после чего (после охлаждения до комнатной температуры) выпаривали на водяной бане при 75 °C, а в виале для парофазного анализа создавали вакуум. Гидролизованный раствор образца затем смешивали с разбавленными реагентами для дериватизации A и B из набора для метода.

Разделение проводили на колонке Welch Ultisil Amino Acid (4,6×250 мм, 5 мкм) по градиентной программе с использованием раствора тригидрата ацетата натрия: ацетонитрила (93:7) в качестве подвижной фазы А и ацетонитрила: воды (80:20) в качестве подвижной фазы В. Детектирование проводили с помощью детектора PDA/UV.

Метод успешно позволил разделить и количественно определить 14 аминокислот в семаглутиде с высокой линейностью (коэффициент корреляции не менее 0,99 для всех аминокислот) и низким относительным стандартным отклонением (%RSD пика каждой аминокислоты менее 5,0%).

Метод ВЭЖХ, разработанный с использованием набора Welch's Amino acid method, был тщательно валидирован для определения молярных соотношений аминокислот в семаглутиде. Параметры валидации включали пригодность системы, специфичность, линейность и диапазон, точность, прецизионность и промежуточную прецизионность (надёжность).

• Пригодность системы была установлена ​​путем оценки повторяемости площадей пиков аминокислот в трех инъекциях стандартного раствора с %RSD < 5,0%.
• Специфичность определялась путем наблюдения за тем, как все пики аминокислот, полученные из стандартного раствора, хорошо разделены друг с другом и проходят тест на чистоту пиков.
• Линейность оценивали в диапазоне концентраций от 12,5% до 200% от уровня спецификации, используя пять уровней концентрации для каждой аминокислоты. Каждый уровень вводили трижды. Регрессионный анализ показал коэффициенты корреляции (R²) не менее 0,99 для всех аминокислот, а также наклон, отсекаемое значение и процентное отсечение по оси Y в пределах допустимых значений.
• Точность была подтверждена исследованиями восстановления, проведенными при 80%, 100% и 120% стандартной концентрации. Каждый уровень вводился трижды.
• Точность метода оценивалась с помощью шести независимых приготовлений образцов тестового семаглутида, при этом %RSD для шести препаратов составил менее 5,0%.
• Промежуточная прецизионность (надежность) была достигнута путем повторения того же теста вторым аналитиком с использованием других колонок, приборов и дней. Все двенадцать определений (сумма точности метода и промежуточной прецизионности) показали кумулятивный %RSD в пределах 5,0%.

Компания Welch Materials стремится развивать хроматографическую науку, тесно сотрудничая с отраслевыми партнерами и исследовательскими институтами. Успешное использование нашего набора для аминокислотного метода компанией Precise Biopharma подчёркивает важность высококачественных расходных материалов и технической поддержки для достижения аналитического совершенства.

В условиях стремительного развития биофармацевтических инноваций, особенно в области пептидной и белковой терапии, способность разрабатывать надёжные аналитические методы остаётся крайне важной. Анализ аминокислот играет ключевую роль в обеспечении безопасности, эффективности и соответствия продукции нормативным требованиям на всех этапах – от разработки рецептуры до её выпуска.