Меры предосторожности при использовании сахарных колонок Уэлча

Меры предосторожности при использовании сахарных колонок Уэлча

Сахарные колонки Уэлча плотно заполнены смолой в расправленном виде. Если образец был правильно подготовлен, большинство проблем связано с повреждением смоляной набивки.

Основные проблемы, связанные с насадкой сахарной колонны:

1. Резкое увеличение или уменьшение давления в колонке: Резкие изменения давления могут повредить насадочный материал.

2. Давление превышает максимально допустимое (14 МПа): Превышение давления сверх максимально допустимого для набивки может привести к повреждению.

3. Неспособность органических растворителей проникать в колонку: если органические растворители не могут проходить через колонку с сахаром, это может вызвать проблемы с производительностью.

4. Большие перепады температур в упаковке: Значительные перепады температур могут повлиять на целостность упаковочного материала.

Подробная разбивка:

Внезапное увеличение или уменьшение давления в колонне

• Принцип работы: Растянутая смоляная насадка очень хрупкая. Резкие падения или повышения давления могут привести к её разрыву или смещению внутри хроматографической колонки, повреждая её слой и нарушая хроматографическое удерживание. Кроме того, обломки насадки могут попасть на выходной фильтр колонки, заблокировав его и ещё больше повысив давление в колонке.

Что вызывает резкие изменения давления в колонне?

• Проблемы с обратными клапанами: Проблемы с обратными клапанами могут привести к колебаниям давления, поэтому важно регулярно проверять правильность работы прибора.

• Засоренные встроенные фильтры или защитные колонны: Накопление частиц во встроенных фильтрах или защитных колоннах может привести к повышению противодавления.

• Чрезмерная пульсация: большие пульсации могут привести к резким изменениям давления, поэтому регулировку расхода следует выполнять постепенно.

• Другие причины:

  • Проблемы с подвижной фазой
  • Проблемы с насосом
  • Перегрузка объема впрыска
  • Утечки в системе
  • Изменения температуры в помещении.

Давление в колонне превышает максимально допустимую нагрузку на насадку

• Расход: максимальный расход не должен приводить к превышению давления 14 МПа.

• Загрязненные встроенные фильтры или защитные колонки: если эти компоненты засорены, необходимо заменить фильтр или колонку.

• Засорение сахарной колонны: Если сама сахарная колонна засорилась, ее следует регенерировать и очистить в соответствии с инструкцией по эксплуатации.

Органические растворители не должны попадать в сахарную колонку.

Принцип : Коэффициент набухания материала насадки сахарной колонки меняется в органических растворителях, что может привести к разрушению слоя колонки и, как следствие, к ее повреждению.

Большие перепады температур в упаковочном материале

Принципы :

1. Неравномерное тепловое расширение и сжатие : при значительной разнице температур в различных частях насадки, её расширение и сжатие, вызванные изменениями температуры, будут различаться. Это неравномерное тепловое расширение и сжатие могут создавать давление между частицами насадки, что может привести к их растрескиванию, деформации или ослаблению связей, что может привести к повреждению конструкции колонны.

2. Влияние на стабильность неподвижной фазы : Резкие перепады температуры могут повлиять на химическую стабильность неподвижной фазы в колонке с сахаром. Например, некоторые химические связи могут быть разрушены под действием термического напряжения, что приводит к изменению химических свойств неподвижной фазы и, следовательно, к снижению её способности разделять и удерживать образцы.

3. Разрушение слоя насадки колонки : большая разница температур может вызвать чрезмерную усадку части насадочного материала, что может привести к частичному разрушению слоя насадки. Это может нарушить равномерное распределение насадки внутри колонки, повлиять на траекторию и скорость потока подвижной фазы, что приведет к снижению эффективности колонки и сделает ее непригодной к использованию.

4. Образование пузырьков : Резкие перепады температуры могут изменить растворимость газов в подвижной фазе, что приводит к образованию пузырьков. Эти пузырьки могут нарушить нормальное течение подвижной фазы в колонке, усилить колебания давления и повредить колонку. Например, работа колонки с сахаром в условиях высокой температуры с последующим резким охлаждением или резким нагреванием в условиях низкой температуры может легко вызвать эти проблемы, что в конечном итоге приведет к повреждению колонки.

Все это факторы, которые могут привести к повреждению основания колонны, поэтому важно избегать связанных с этим неправильных операций:

1. Чтобы предотвратить попадание органических растворителей и пузырьков в колонку с сахаром, перед подключением колонки с сахаром промойте всю хроматографическую систему водой.

2. Прежде чем температура колонки достигнет заданного значения, установите скорость потока на уровне 0,2–0,3 мл/мин, чтобы избежать чрезмерно высокого давления в колонке.

3. Когда температура колонки достигнет заданного значения, увеличьте скорость потока до аналитической. Изменяйте скорость потока с шагом 0,1 мл/мин и дождитесь стабилизации давления в колонке, прежде чем увеличивать скорость потока. Это позволит избежать пульсаций давления, которые могут повредить колонку; аналогично уменьшайте скорость потока с шагом 0,1 мл/мин.

4. Максимальный расход не должен приводить к превышению давления 14 МПа.

5. После использования обязательно понизьте температуру колонки до комнатной, прежде чем останавливать насос, извлекать колонку и хранить ее в холодильнике при температуре 4°C.

6. После извлечения колонки из холодильника дайте ей нагреться до комнатной температуры, прежде чем использовать её в приборе и повышать температуру колонки. Это предотвратит повреждение слоя колонки из-за большой разницы температур.

7. Полностью дегазируйте подвижную фазу, чтобы обеспечить стабильную базовую линию.

8. После каждого использования тщательно промывайте колонку дистиллированной водой для замены подвижной фазы, содержащей соли. Если колонка не будет использоваться в течение длительного времени, храните её в соответствии с рекомендуемой процедурой хранения.

Профиль колонки сахара Уэлча

Компания Welch Materials представила две ионообменные колонки на основе полимеров: колонки H-типа и колонки Ca-типа для разделения сахаров. Колонки H-типа для разделения сахаров в основном используются для разделения органических кислот и являются специализированными колонками для тестирования рибавирина в Китайской фармакопее . Колонки Ca-типа для разделения сахаров превосходно подходят для разделения полисахаридов и полиолов.

Параметры хроматографической колонки

Инструкции по активации новой колонки, регулярной промывке, методам хранения и регенерации см. в Руководстве по колонкам для жидкостной хроматографии Welch.