Understanding HPLC Pumps (Part I): Common Misconceptions

Понимание насосов ВЭЖХ (Часть I): Распространенные заблуждения

Введение

В последние месяцы мы получили много запросов от пользователей с просьбой дать совет по насосам ВЭЖХ. Поскольку наши колонки Welch используются пользователями, работающими с приборами разных производителей, эта статья не будет ограничиваться какой-либо конкретной маркой при обсуждении принципов и обслуживания насосов ВЭЖХ.

(Примечание: все изображения в этой статье принадлежат их соответствующим владельцам. Эти изображения используются только в пояснительных целях, и мы не обладаем их авторскими правами)

Первый вопрос: Как понять «количество каналов насоса?»

«Ваш насос ВЭЖХ одинарный, бинарный или четвертичный?»

Чтобы ответить на этот вопрос, необходимо уточнить, что количество каналов (одинарный, бинарный, четвертичный и т. д.) — это количество независимо управляемых каналов растворителя, исключая промывочные растворители для насоса или автосэмплера. Оно зависит только от независимо управляемых линий растворителя, а не от количества головок или модулей насоса.

Пример 1: Почему этот насос выглядит как два, но называется одним?

Shimadzu LC-10AT
Рис. 1. Shimadzu LC-10AT

Этот Shimadzu LC-10AT — одинарный насос. Хотя он и имеет две головки насоса, обе приводятся в действие синхронно одним двигателем. Главная и вспомогательная головки работают вместе в последовательной конфигурации для подачи подвижной фазы, как показано на схеме ниже.

Schematic of LC-20AT Pump System
Рис. 2. Схема насосной системы LC-20AT

Пример 2: Один модуль, две головки насоса — сколько каналов?

Quaternary low-pressure pump
Рис. 3. Четвертичный низконапорный насос с смешиванием

Это четвертичный низконапорный насос с смешиванием.

Пример 3: Тоже один модуль с двумя головками —

Binary high-pressure pump with built-in damper
Рис. 4. Бинарный высоконапорный насос

Но это бинарный высоконапорный насос со встроенным демпфером.

Распространенные заблуждения о насосах ВЭЖХ

Непонимание количества каналов — это распространенное заблуждение, которое легко возникает, когда пользователи не до конца понимают различия между насосами разных марок, серий или моделей, наряду с несколькими другими заблуждениями. Мы полностью обсудим их в этой главе.

Миф 1: Количество головок насоса равно количеству каналов

Как видно на Рис. 1 выше, хотя LC-10AT имеет две головки, это все же одноканальный насос, потому что имеется только один канал растворителя. 

Некоторые одинарные насосы также имеют основную и вспомогательную камеры с двумя плунжерами, как показано на рисунке ниже.

Dual-plunger Pump
Рис. 5. Двухплунжерный насос

Миф 2: Количество модулей равно количеству каналов

Старые модели Shimadzu, такие как LC-10AT или LC-20AT, широко используются нашими клиентами, и большинство из них оснащены бинарным смешиванием высокого давления. Это привело к тому, что некоторые пользователи ошибочно полагали, что бинарные системы имеют ровно два модуля.

Однако насосы, показанные на Рис. 2 (четвертичный) и Рис. 3 (бинарный), являются одномодульными.

Pumps on Agilent website
Рис. 6. Насосы на сайте Agilent

Например, 1260 Infinity III от Agilent также предлагает как бинарные, так и четвертичные варианты в одном модуле.

Миф 3: Системы высокого давления выдерживают более высокое давление, чем системы низкого давления

Например, Shimadzu LC-20AT может быть сконфигурирована как четвертичная низконапорная (один насос LC-20AT и четыре низконапорных дозирующих клапана) или как бинарная высоконапорная (два насоса LC-20AT и смеситель) система — однако максимальное рабочее давление в обоих случаях одинаково.

«Высокое давление» и «низкое давление» указывают на то, происходит ли смешивание растворителей при высоком или низком давлении, а не на предел давления прибора.

Миф 4: Бинарные системы высокого давления идентичны UPLC-системам

Некоторые считают, что, поскольку бинарные системы смешивают при высоком давлении, они эквивалентны UPLC-системам. Это неверно.

На самом деле, как описано выше, высокое и низкое давление смешивания лишь описывают позиции смешивания растворителя, а не номинальные значения давления в системе.

Характеристики ВЭЖХ УВЭЖХ Преимущества
Рабочее давление ≤ 400 бар 600–1500 бар Позволяет использовать более мелкие частицы и более быструю скорость потока
Размер частиц 3–5 мкм 1,7–2 мкм Более высокая эффективность и более острые пики
Скорость анализа Медленнее В 3–5 раз быстрее Экономия времени, более высокая пропускная способность
Чувствительность Ниже Выше Обнаружение следовых аналитов
Расход растворителя Выше До 80% меньше Более низкая стоимость, более экологичная эксплуатация
Объем системы Больше Меньше (в мёртвом объёме) Меньшее рассеяние пика, более высокое разрешение

Таблица 1. Сравнение ВЭЖХ и УВЭЖХ

Миф 5: Параллельные насосы всегда лучше последовательных насосов

Таблица ниже объясняет это сама.

Аспект сравнения Последовательный двухпоршневой насос Параллельный двухпоршневой насос
Пульсация давления Умеренная Очень низкая
Точность расхода Умеренная (отн. станд. откл. ≈ 0,1–0,5 %). Мгновенный расход может колебаться. Очень высокая (отн. станд. откл. < 0,1 %). Стабильный мгновенный расход, идеален для градиентного элюирования или следового анализа
Объём системы Малый. Мёртвый объём в основном связан с жидкостным цилиндром и обратным клапаном. Идеально подходит для быстрого разделения (например, УВЭЖХ) Больше на 5–15%, может влиять на быстрое разделение (например, расширение пика). Требуется конфигурация смесителя.
Стоимость обслуживания Ниже; более простая конструкция, меньше расходных материалов (клапанов/уплотнений), меньшая частота обслуживания Выше; удвоенное количество клапанов/уплотнений, требуется регулярная очистка смесителя

Таблица 2. Сравнение параллельных и последовательных насосов

Проверьте себя: Можете ли вы определить количество каналов в каждой из четырёх представленных ниже блок-схем?

Single pump
Quaternary low-pressure pump
Binary high-pressure pump
Quaternary high-pressure pump
+ Ответы (нажмите, чтобы развернуть):
  • Одиночный насос
  • Четвертичный низконапорный насос
  • Бинарный высоконапорный насос
  • Четвертичный высоконапорный насос

Перейти к Части II:

Понимание насосов ВЭЖХ: Практическое обслуживание


Understanding HPLC Pumps (part II):Practical Maintenance