
В 2023 году Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) одобрило к выпуску на рынок в общей сложности 55 новых лекарственных средств, среди которых биологические макромолекулярные препараты (включая моноклональные антитела, малые нуклеиновые кислоты и пептидные препараты) составили 23, что составляет 42% от общего числа. Это демонстрирует непрерывный интерес к области биофармацевтики.

Обращенно-фазовая хроматография, один из наиболее широко используемых инструментов в арсенале хроматографистов, ценится за высокую чувствительность, универсальность и отличные разделительные способности. Она широко применяется при анализе биологических макромолекул, таких как белки. При выборе обращенно-фазовых колонок обычно используется правило: чем больше молекулярный вес, тем короче алкильная цепь, и рекомендуется использовать колонки с большим размером пор.
Welch Materials недавно представила хроматографическую колонку Xtimate® C4 300Å, которая обеспечивает типичное обращенно-фазовое разделение и характеризуется высокой эффективностью колонки, долгим сроком службы и широкой толерантностью к pH. Она идеально подходит для анализа биологических макромолекул.

Представление продукта
Серия Xtimate® включает высокочистые кремнеземные матрицы, поверхность которых связана с органико-неорганическими гибридными слоями, что является результатом непрерывных инновационных исследований и прорывов в технологии модификации поверхности командой научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ Welch Materials. Эта уникальная комбинация наделяет продукт как высокой эффективностью колонки и механической прочностью, характерными для кремнеземных матриц, так и высокой устойчивостью к pH, обычно связанной с полимерными наполнителями. Это практически идеальный высококачественный продукт для ВЭЖХ-хроматографических колонок, представляющий текущий международный передовой уровень.
Особенности продукта
- Диапазон pH расширен до 1,0-12,5.
- Доступны наполнители из кремнеземных микросфер размером 5 мкм и 3 мкм.
- Отличная стабильность для применений с высоким pH.
Параметры производительности
- Связанная фаза: C4
- Углеродная нагрузка: 4%
- Размер пор: 300Å
- Размер частиц: 5мкм/3мкм
- Удельная поверхность: 100м2/г
- Стабильность pH: 1,0-12,5
- Максимальная допустимая температура: 60℃
- Номер USP: L26

Пример применения
Пример применения 1: Определение множества белков
Условия ВЭЖХ:
-
Колонка:
- Xtimate® C4, 3μm, 300Å, 4.6×150mm
- Xtimate® C4, 5μm, 300Å, 4.6×150mm
-
Подвижная фаза:
- A: 0.1% TFA Вода
- B: 0.1% TFA Ацетонитрил
- Длина волны детектирования: 220нм
- Температура колонки: 60℃
- Скорость потока: 1.0мл/мин
- Объем инжекции: 10мкл
-
Концентрация инжекции:
- Рибонуклеаза (0.2мг/мл)
- Цитохром С (0.2мг/мл)
- Лизоцим (0.2мг/мл)
- α-Лактальбумин (0.2мг/мл)
- Каталаза (0.2мг/мл)
- Карбоангидраза (0.2мг/мл)
Процедура градиентного элюирования:
| Время/мин | A % | B % |
| 0.0 | 85 | 15 |
| 15.0 | 50 | 50 |
| 15.1 | 5 | 95 |
| 18.0 | 5 | 95 |
| 18.1 | 85 | 15 |
| 27.0 | 85 | 15 |
Xtimate ® C4, 3μm, 300Å, 4.6×150mm

Xtimate ® C4, 5μm, 300Å, 4.6×150mm


Пример применения 2: Определение человеческого эритропоэтина
Хроматографические условия и программа градиентного элюирования: Те же, что и в Примере 1.
Подготовка образца: Точно взвесить 1,0 мг стандартного образца человеческого эритропоэтина, добавить 1,0 мл воды, растворить, хорошо встряхнуть, и он готов к использованию.
Xtimate ® C4, 3μm, 300Å, 4.6×150mm

Xtimate ® C4, 5μm, 300Å, 4.6×150mm

Пример применения 3: Определение лактоферрина
Хроматографические условия и программа градиентного элюирования: Те же, что и в Примере 1.
Подготовка образца: Точно взвесить 1,0 мг стандартного образца лактоферрина, добавить 1,0 мл воды, растворить, хорошо встряхнуть, и он готов к использованию.
Xtimate ® C4, 3μm, 300Å, 4.6×150mm

Xtimate ® C4, 5μm, 300Å, 4.6×150mm

Вывод:
Использование колонки ВЭЖХ Xtimate® C4 300Å для анализа белковых образцов обеспечивает отличную разделительную способность и хорошую форму пиков, соответствуя требованиям детектирования.
Наличие двух спецификаций по размеру частиц способствует анализу белковых образцов.