HPLC Column

Анализ биополимеров с помощью ВЭЖХ-колонки Welch Xtimate C4 300Å. Выпуск!

В 2023 году Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) одобрило к выпуску на рынок в общей сложности 55 новых лекарственных средств, среди которых биологические макромолекулярные препараты (включая моноклональные антитела, малые нуклеиновые кислоты и пептидные препараты) составили 23, что составляет 42% от общего числа. Это демонстрирует непрерывный интерес к области биофармацевтики.

Обращенно-фазовая хроматография, один из наиболее широко используемых инструментов в арсенале хроматографистов, ценится за высокую чувствительность, универсальность и отличные разделительные способности. Она широко применяется при анализе биологических макромолекул, таких как белки. При выборе обращенно-фазовых колонок обычно используется правило: чем больше молекулярный вес, тем короче алкильная цепь, и рекомендуется использовать колонки с большим размером пор.

Welch Materials недавно представила хроматографическую колонку Xtimate® C4 300Å, которая обеспечивает типичное обращенно-фазовое разделение и характеризуется высокой эффективностью колонки, долгим сроком службы и широкой толерантностью к pH. Она идеально подходит для анализа биологических макромолекул.

 Представление продукта 

Серия Xtimate® включает высокочистые кремнеземные матрицы, поверхность которых связана с органико-неорганическими гибридными слоями, что является результатом непрерывных инновационных исследований и прорывов в технологии модификации поверхности командой научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ Welch Materials. Эта уникальная комбинация наделяет продукт как высокой эффективностью колонки и механической прочностью, характерными для кремнеземных матриц, так и высокой устойчивостью к pH, обычно связанной с полимерными наполнителями. Это практически идеальный высококачественный продукт для ВЭЖХ-хроматографических колонок, представляющий текущий международный передовой уровень.


Особенности продукта

  • Диапазон pH расширен до 1,0-12,5.
  • Доступны наполнители из кремнеземных микросфер размером 5 мкм и 3 мкм.
  • Отличная стабильность для применений с высоким pH.

Параметры производительности

  • Связанная фаза: C4
  • Углеродная нагрузка: 4%
  • Размер пор: 300Å
  • Размер частиц: 5мкм/3мкм
  • Удельная поверхность: 100м2/г
  • Стабильность pH: 1,0-12,5
  • Максимальная допустимая температура: 60℃
  • Номер USP: L26

Пример применения


Пример применения 1: Определение множества белков

Условия ВЭЖХ:

  • Колонка:
    • Xtimate® C4, 3μm, 300Å, 4.6×150mm
    • Xtimate® C4, 5μm, 300Å, 4.6×150mm
  • Подвижная фаза:
    • A: 0.1% TFA Вода
    • B: 0.1% TFA Ацетонитрил
  • Длина волны детектирования: 220нм
  • Температура колонки: 60℃
  • Скорость потока: 1.0мл/мин
  • Объем инжекции: 10мкл
  • Концентрация инжекции:
    1. Рибонуклеаза (0.2мг/мл)
    2. Цитохром С (0.2мг/мл)
    3. Лизоцим (0.2мг/мл)
    4. α-Лактальбумин (0.2мг/мл)
    5. Каталаза (0.2мг/мл)
    6. Карбоангидраза (0.2мг/мл)

Процедура градиентного элюирования:

Время/мин A % B %
0.0 85 15
15.0 50 50
15.1 5 95
18.0 5 95
18.1 85 15
27.0 85 15

Xtimate ®  C4, 3μm, 300Å, 4.6×150mm


Xtimate ®  C4, 5μm, 300Å, 4.6×150mm

Пример применения 2: Определение человеческого эритропоэтина

Хроматографические условия и программа градиентного элюирования: Те же, что и в Примере 1.

Подготовка образца: Точно взвесить 1,0 мг стандартного образца человеческого эритропоэтина, добавить 1,0 мл воды, растворить, хорошо встряхнуть, и он готов к использованию.

Xtimate ®  C4, 3μm, 300Å, 4.6×150mm

Xtimate ®  C4, 5μm, 300Å, 4.6×150mm


Пример применения 3: Определение лактоферрина

Хроматографические условия и программа градиентного элюирования: Те же, что и в Примере 1.

Подготовка образца: Точно взвесить 1,0 мг стандартного образца лактоферрина, добавить 1,0 мл воды, растворить, хорошо встряхнуть, и он готов к использованию.

Xtimate ®  C4, 3μm, 300Å, 4.6×150mm

Xtimate ®  C4, 5μm, 300Å, 4.6×150mm

Вывод:

Использование колонки ВЭЖХ Xtimate® C4 300Å для анализа белковых образцов обеспечивает отличную разделительную способность и хорошую форму пиков, соответствуя требованиям детектирования.

Наличие двух спецификаций по размеру частиц способствует анализу белковых образцов.