Анализ биополимеров с помощью ВЭЖХ-колонки Welch Xtimate C4 300Å. Выпуск!

В 2023 году Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) одобрило к выпуску на рынок в общей сложности 55 новых лекарственных препаратов, среди которых 23 препарата на основе биологических макромолекул (включая препараты моноклональных антител, препараты малых нуклеиновых кислот и пептидные препараты) составили 42% от общего числа. Это свидетельствует о сохраняющемся интересе к биофармацевтике.

Обращенно-фазовая хроматография, один из наиболее распространенных инструментов в арсенале хроматографистов, ценится за свою высокую чувствительность, универсальность и превосходные разделительные возможности. Она широко применяется для анализа биологических макромолекул, таких как белки. В руководстве по выбору обращенно-фазовых колонок обычно указывается, что чем больше молекулярная масса, тем короче используемая алкильная цепь, и рекомендуется использовать колонки с большим размером пор.

Компания Welch Materials недавно представила хроматографическую колонку Xtimate® C4 300Å, которая обеспечивает типичное обращённо-фазовое разделение, отличается высокой эффективностью, длительным сроком службы и широким диапазоном pH. Она идеально подходит для анализа биологических макромолекул.

Введение в продукт

Серия Xtimate® представляет собой высокочистую матрицу на основе силикагеля, скрепленную органо-неорганическими гибридными слоями, что является результатом непрерывных инновационных исследований и прорывов в области технологий модификации поверхностей, разработанных научно-исследовательским отделом Welch Materials. Это уникальное сочетание обеспечивает продукту как высокую эффективность колонки и механическую прочность, характерные для матриц на основе силикагеля, так и высокую устойчивость к pH, характерную для полимерных наполнителей. Это практически идеальный, высококачественный продукт для ВЭЖХ-хроматографии, соответствующий современному мировому уровню.

Основные характеристики продукта

• Диапазон pH расширен до 1,0-12,5.

• Доступны наполнители в виде кремниевых микросфер размером 5 мкм и 3 мкм.

• Отличная стабильность при использовании в условиях высокого pH.

Параметры производительности

• Фаза связывания: C4
• Углеродная нагрузка: 4%
• Размер пор: 300Å
• Размер частиц: 5 мкм/3 мкм
• Удельная площадь поверхности: 100 м2/г
• Стабильность pH: 1,0-12,5
• Максимально допустимая температура: 60℃
• Номер USP: L26

Дело о применении

Пример применения 1: Определение нескольких белков

Условия ВЭЖХ:

• Столбец:

  • Xtimate® C4, 3 мкм, 300Å, 4,6*150 мм
  • Xtimate® C4, 5 мкм, 300Å, 4,6*150 мм

• Подвижная фаза:

  • A: 0,1% TFA Вода
  • B: 0,1% ТФУ ацетонитрил

• Длина волны обнаружения: 220 нм

• Температура колонки: 60℃

• Скорость потока: 1,0 мл/мин

• Объем инъекции: 10 мкл

• Концентрация инъекции:

  1. Рибонуклеаза (0,2 мг/мл)
  2. Цитохром С (0,2 мг/мл)
  3. Лизоцим (0,2 мг/мл)
  4. α-Лактальбумин (0,2 мг/мл)
  5. Каталаза (0,2 мг/мл)
  6. Карбоангидраза (0,2 мг/мл)

Процедура градиентного элюирования:

Xtimate ^® C4，3 мкм，300Å，4.6*150 мм

Xtimate ^® C4，5мкм，300Å，4.6*150мм

Пример применения 2: Определение человеческого эритропоэтина

Хроматографические условия и программа градиентного элюирования: такие же, как в случае 1.

Подготовка образца: Точно взвесьте 1,0 мг эталонного стандарта человеческого эритропоэтина, добавьте 1,0 мл воды, растворите, хорошо встряхните. Готово к использованию.

Xtimate ^® C4，3 мкм，300Å，4.6*150 мм

Xtimate ^® C4，5мкм，300Å，4.6*150мм

Пример применения 3: Определение лактоферрина

Хроматографические условия и программа градиентного элюирования: такие же, как в случае 1.

Подготовка образца: Точно взвесьте 1,0 мг эталонного стандарта лактоферрина, добавьте 1,0 мл воды, растворите, хорошо встряхните. Образец готов к использованию.

Xtimate ^® C4，3 мкм，300Å，4.6*150 мм
Xtimate ^® C4，5мкм，300Å，4.6*150мм

Заключение:

Использование колонки ВЭЖХ Xtimate® C4 300Å для анализа образцов белков обеспечивает отличную разделительную способность и хорошую форму пиков, отвечающую требованиям обнаружения.

Наличие двух спецификаций размера частиц облегчает анализ образцов белка.