Иммуноаффинные картриджи для микотоксинов: распространенные вопросы и ответы
Иммуноаффинные картриджи для определения микотоксинов — эти картриджи адсорбируют микотоксины, используя специфическое взаимодействие антигенов и антител. У новичков часто возникает множество вопросов. Наиболее часто задаваемые вопросы:
- «Как использовать иммуноаффинный картридж?»
- «Нужно ли сохранять консервирующий раствор в картридже при пропускании через него образца?»
- «Повлияет ли это на результаты, если я не добавлю буфер PBS?»
- «Повлияет ли непосредственное использование картриджа без подготовки на процесс восстановления?»
- «Я забыл вынуть картридж и оставил его на улице на несколько дней. Его ещё можно использовать?»
Кроме того, некоторые опытные пользователи часто спрашивают:
- «Почему процент выздоровления такой низкий?»
В ответ на многочисленные вопросы клиентов о правильном использовании иммуноаффинных картриджей и на некоторые моменты, на которые следует обратить внимание, мы обобщили ключевые аспекты, которые помогут вам понять этот процесс:
Инструкция по применению
1. Установка и подготовка колонны
Извлеките иммуноаффинный картридж из места хранения и дайте ему нагреться до комнатной температуры не менее 30 минут. Подсоедините шприц для ввода образца к иммуноаффинному картриджу, затем установите его на стойку насоса или устройство для твердофазной экстракции. Убедитесь, что картридж установлен правильно, и проверьте его герметичность и целостность.
2. Подготовка образца
Выберите подходящий буферный раствор для разбавления образца, исходя из свойств очищаемого вещества. Перед введением раствора образца в картридж для аффинной хроматографии выполните необходимые этапы предварительной обработки, такие как фильтрация или центрифугирование, для удаления примесей, которые могут помешать анализу. Кроме того, контролируйте pH и ионную силу образца для облегчения связывания целевых молекул.
3. Загрузка образца
Перед загрузкой удалите консервант. Во время загрузки образца контролируйте скорость потока, чтобы предотвратить потерю целевых молекул или неспецифическую адсорбцию из-за слишком быстрого или медленного потока.
4. Стирка
Используйте необходимое количество промывочного буфера для промывки картриджа, чтобы удалить несвязанные примеси. Этот шаг имеет решающее значение для повышения чистоты очищенного продукта.
5. Элюирование
Используйте подходящий элюирующий буфер, например, изменяющий pH или увеличивающий концентрацию соли, чтобы разрушить нековалентные связи между антигеном и антителом и высвободить целевое вещество. Соберите элюат для получения очищенного продукта.
Меры предосторожности
(Следующие 7 пунктов могут повлиять на скорость восстановления!)
Избегайте использования сухих колонок: Иммуноаффинные картриджи нельзя сушить, так как это может снизить активность антител. Колонка всегда должна оставаться влажной во время использования. Если консервант внутри картриджа уже высох к моменту использования, использовать его не рекомендуется.
Контроль температуры: Иммуноаффинные картриджи следует хранить при температуре от 2°C до 8°C. Все операции следует проводить при комнатной температуре, если не указано иное. Чрезмерно высокие или низкие температуры могут повлиять на эффективность связывания антигена с антителом.
-
Предотвращение закупорки: Образцы следует предварительно отфильтровать или центрифугировать, чтобы удалить любые частицы, которые могут засорить картридж.
Контроль скорости потока: рекомендуемая скорость потока составляет от 0,5 до 2 мл/мин. Избегайте чрезмерной или недостаточной скорости потока для обеспечения полного взаимодействия образца с антителами.
-
Требования к раствору для иммуноаффинных картриджей:
- Концентрация органической фазы, как правило, не должна превышать 10% для метанола и 20% для ацетонитрила. pH промывочного или загрузочного раствора должен быть в пределах от 6 до 8, иначе это может повлиять на скорость извлечения.
- Для элюирования рекомендуется использовать 2 мл 2% раствора уксусной кислоты в метаноле. При использовании чистого метанола элюирование может быть неполным, что приведет к снижению степени извлечения.
- В зависимости от целевого соединения может потребоваться корректировка условий элюирования, таких как pH или концентрация соли, для достижения оптимальной очистки.
-
Не используйте просроченные картриджи: Просроченные картриджи не следует использовать, а использованные картриджи следует утилизировать надлежащим образом, чтобы избежать загрязнения окружающей среды.
Следуйте инструкциям производителя: строго соблюдайте инструкции производителя, особенно касающиеся выбора буфера и условий элюирования. При возникновении любых проблем незамедлительно обращайтесь в службу технической поддержки производителя.